Ventajas e inconvenientes de la transformación genética del castaño como método de mejora genética

Tanto el castaño europeo como el americano son susceptibles a las enfermedades causadas por hongos, las más devastadoras son la de la tinta (causada por Phytophthora spp.) y la del cáncer o chancro (causada por Cryphonectria parasitica). Mediante cruzamientos con los castaños asiáticos (resistentes a tinta y a chancro), se han desarrollado híbridos que han paliado el efecto negativo de las enfermedades. Sin embargo, estos híbridos o bien pierden las características típicas del castaño europeo y del castaño americano o bien se depura la información genética asiática mediante un proceso de retrocruzamientos, proceso para el que se necesitan alrededor de 20 años de esfuerzo. Las nuevas herramientas de la biotecnología (marcadores moleculares y transformación genética) posiblemente ayuden a reducir drásticamente el período de mejora. En concreto, mediante la producción de castaños transgénicos será posible, a corto plazo, disponer de árboles resistentes en un período de 2-4 años de trabajo. En esta revisión se pretende hacer un estudio comparativo de los sistemas convencionales de mejora genética del castaño y la aportación de la biotecnología en la consecución de castaños resistentes en un corto período de tiempo.Peer reviewe

Preservation of Quercus robur germplasm by cryostorage of embryogenic cultures derived from mature trees and rapd analysis of genetic stability

This study reports on the cryostorage of embryogenic lines derived from selected mature Quercus robur trees, following application of the PVS2-vitrification based procedure. In seven oak genotypes, embryo recovery levels ranging from 57-92% were obtained when 4-6 mg embryo clumps were precultured for 3 days on 0.3 M sucrose basal medium, treated with PVS2 solution for 60 min at 24ºC, and then immersed in liquid nitrogen (LN). Embryos of six out of seven lines were cryostored for one week and one year and used to evaluate cryopreservation tolerance, germination ability and to assess genetic fidelity by random amplified polymorphic DNA (RAPD) markers. There were no significant differences between the recovery frequencies of samples retrieved from LN after 1 week and 1 year of cryostorage. In five out of six lines, RAPD profiles of cryopreserved somatic embryos and regenerated plantlets were identical to those of the controls. Although polymorphisms were detected in only one cryostored embryo of one genotype, no genetic instability was found in the regenerated plantlets. This methodology appears to be suitable for long-term storage of this valuable germplasm, as the recovered plantlets were found to be genetically stable.Xunta de Galicia project: PGIDIT03RFO40001PR MEC (Spain) project: AGL2006-01387/FORPeer reviewe

On-line academic tutoring implementation in a basic subject of veterinary degree

[ES] La  tutoría  es  una  herramienta  útil  en el  proceso  de  enseñanza-aprendizaje universitario, aunque su desarrollo se ve dificultado en las aulas masificadas. Con este estudio se ha pretendido potenciar esta  función  tutorial  en  una  asignatura en  la  que  concurre  esta  circunstancia, con  el  fin  de  mejorar  el  rendimiento académico del alumnado. Para ello, se ha implementado un programa de tutorías en línea en la asignatura de “Microbiología e Inmunología” del Grado en Veterinaria de la Universidad de León, mediante la plataforma virtual Moodle. Cuarenta estudiantes se incorporaron voluntariamente (25% de la matrícula) al estudio, en menos de un día. Se elaboraron tres cuestionarios de quince preguntas  sobre  la  materia  impartida, con  el  objetivo  de  fomentar  el  trabajo del estudiante. Finalizado el periodo de resolución  establecido,  los  estudiantes obtenían automáticamente la calificación y las respuestas correctas. Posteriormente, se habilitaban tres días pa[EN] Tutoring is a useful tool in the university teaching-learning  process,  although  its development is impaired in overcrowded classrooms. In this study, we have tried to strengthen the tutoring function, which is complex in subjects with high number of students, in order to improve academic efficiency.  For  this  purpose,  on-line tutoring have been implemented in the subject “Microbiology and Immunology”, belonging  to  Veterinary  Degree  at  the University of León, by means of Moodle. Forty students who registered voluntarily were  accepted  (25%  of  the  students enrolled). They filled these places in less than one day. Three on-line questionnaires with  fifteen  questions  each  about  the subject taught were carried out, in order to promote the student work. Once the time given for their reply had finished, students automatically got the answers and their marks. Then, they had three days to clarify any doubts by e-mail. In addition, satisfaction  surveys  were  made  among stud.La realización de este estudio ha sido posible gracias a la concesión de un Proyecto de Ayuda a la Innovación Docente (PAID), denominado “La tutoría presencial y on line como herramienta para la adaptación y mejora en el rendimiento académico de asignaturas básicas en el Grado en Veterinaria (TUBAVET)”, concedido por la Universidad de León en su convocatoria de 2013. Este proyecto forma parte de un trabajo coordinado por dos departamentos de la Universidad de León (Ciencias Biomédicas y Sanidad Animal), que fue galardonado con el primer premio al mejor trabajo presentado en el “I Congreso de Docencia Veterinaria”, celebrado en Lugo en septiembre de 2014, organizado por la “Asociación Española de Veterinarios Docentes (VetDoc)”.Gutiérrez Martín, C.; García Iglesias, M.; Pérez Martínez, C.; Sahagún Prieto, A.; Martínez Martínez, S.; Díez Láiz, R.; López Cadenas, C.... (2015). Implementación de tutorías académicas en línea en una asignatura básica del grado en veterinaria. REDU. Revista de Docencia Universitaria. 13(3):97-122. https://doi.org/10.4995/redu.2015.5469OJS97122133Álvarez, P. (2005). La tutoría universitaria en la nueva coyuntura de la enseñanza superior: el programa VELERO. Contextos Educativos, 8-9, 281-293.Álvarez, P., Álvarez, D., González, M. (2001). Evaluación de la implantación de un plan de tutoría en la universidad. X Congreso Nacional de Modelos de Investigación Educativa: Investigación y evaluación educativa en la sociedad del conocimiento.A Coruña.Álvarez, P., González, M. (2003). La tutoría de iguales en la enseñanza superior: un estudio realizado en la Universidad de La Laguna. XI Congreso Nacional de Modelos de Investigación Educativa: Investigación y Sociedad, Granada.Álvarez, P.R., González, M.C. (2008). Análisis y valoración conceptual sobre las modalidades de tutoría universitaria en el Espacio Europeo de Educación Superior. Revista Interuniversitaria de Formación del Profesorado, 22, 21-48.Bricall, J.M. (2000a). Informe Universidad 2000. III. Difusión del Conocimiento: Formar para aprender. Conferencia de Rectores de las Universidades Españolas. Barcelona, 186-87. www.oei.es/oeivirt/bricall.htm.Bricall, J.M. (2000b). Informe Universidad 2000. IX. Redes Tecnológicas y Redes Universitarias. Conferencia de Rectores de las Universidades Españolas. Barcelona, 455. www.oei.es/oeivirt/bricall.htm.Chen, J.Y., Lee M.C., Lee, H.S., Wang, Y.C., Lin, L.Y., Yang, J.H. (2006). An online evaluation of problem-based learning (PBL) in Chung Shan Medical University, Taiwan- A pilot study. Annals Academy of Medicine, 35, 624-633.Del Rincón, B. (2000). Tutorías personalizadas en la universidad. Servicio de Publicaciones de la Universidad de Castilla-La Mancha, Toledo.Díez Liébana, M.J., Mauriz Gutiérrez, J.L., Gutiérrez Martín, C.B. (2006). Modelo de Guía Docente. Universidad de León.Durán, D., Vinyent, V. (2004). Tutoría entre iguales: de la teoría a la práctica. Ed. Graó, Barcelona.Lee, W.S.C., Cholowski, K., Williams, A.K. (2002). Nursing students' and clinical educators' perceptions of characteristics of effective clinical educators in an Australian University school of nursing. Journal of Advanced Nursing, 29, 412-420. https://doi.org/10.1046/j.1365-2648.2002.02306.xLobato, C. (2003). Estrategias y recursos para el desarrollo de la acción tutorial en la Universidad. En: Álvarez, P. & Jiménez, H. (eds.) Tutoría Universitaria. Servicio de Publicaciones de la Universidad de La Laguna, Tenerife, 51-77.Markowsitsch, J., Plaimauer, C. (2009). Descriptors for competence: towards an international standard classification for skills and competences. Journal of European Industrial Training, 33, 817-837. https://doi.org/10.1108/03090590910993652Sebastián, A., Sánchez, M.F. (1999). La función tutorial en la Universidad y la demanda de atención personalizada en la orientación. 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Castanea sativa plantlets proliferated from axillary buds cultivated in vitro

Chestnut plants were proliferated in vitro from axillary buds of juvenile shoots. N6-Benzyl-aminopurine (BAP) at 0.1-0.5 mg l-1 was optimal for shoot multiplication. The important role played by the macronutrient formula on shoot multiplication, and especially on the rooting-stage, is emphasized. The MS ( 1 2 NO3) macronutrients gave the best rooting percentage as well as the highest number of roots per rooted shoot. In these experiments, shoots remained in the 3 mg l-1 indole-3-butyric acid (IBA) medium for 12 days, after which they were transferred to an auxin-free medium where roots developed fully. Optimum rooting was achieved by immersing the 1 cm basal end of shoots in concentrated IBA solutions (0.5-1 mg ml-1) for periods ranging from 2 to 15 min.Peer reviewe

Embriogénesis somática en Fagáceas: problemas y perspectivas

Trabajo presentado en la VIII Reunión de la Sociedad Española de Cultivo in vitro de Tejidos Vegetales, celebrada en Murcia (España), del 16 al 18 de septiembre de 2009La inducciÓn de la embriogénesis somática (ES)en especies de tres géneros representativos de las Fagáceas, Fagus, Castanea y Quercus ha tomado un impulso notable desde la década de los años 90 hasta el momento actual. Durante. este período se han identificado los logros y los problemas surgidos en las diferentes etapas del proceso embriogénico, que trataremos de resumir Quizá un hecho relevante a destacar sea el material vegetal uti izado, especies de importancia forestal y económica que son doblemente recalcitrantes no solo por la conservación de sus semillas sino también por su propagación vegetativa. Teniendo en cuenta estas características y, al igual que ocurre en mucha~,especies leñosas, la inducción de ESdista de estar controlada, siendo los principales factores de influencia, el genotipo, a edad del material de partida, tipo de explanto y su estado fisi::Jlógic%ntogenético, así como la composición del medio y la~¡condiciones físicas del cultivo incluyendo su período de aplicación. En los tres géneros, los embriones cigóticos inmaduros constituyen el material más reactivo para inducir ES, siempre que se determine su estado de desarrollo más adecuado que suele corresponder con el estado cotiledonar temprano, antes de que se produzca la acumulación de sustancias de reserva en los cotiledones. Se ha obtenido respuesta embriogénica a partir de embriones inmaduros de Castanea sativa, C. dentata, Fagus sylvatica, F. grandiflora y un gran número de importantes especies del género Quercus, entre las que se incluyen O. suber; Q. robur; Q. petraea, Q. alba, Q. rubra. Q. ilex. A peS3r de las enormes ventajas que supondría la inducción de ESen material más diferenciado que el de la etapa cigótica, esta información es muy limitada, destacando los logros obtenidos a pélrtir de explantos foliares de alcornoque (Hernández et al. 2003) y roble, así como los resultados positivos obtenidos con ápice~¡caulinares aislados de cultivos in vitro derivados de material adulto de roble y castaño. Estudios anatómicos revelan pautas de inducción embriogénica muy similares en explantos foliares y ápices caulinares. En ambos tipos de explanto el origen de los embriones es indirecto a partir de tejido de callo originado durante el cultivo en medio de inducción (6 semanas), y que está constituido fundamentalmente por parénquima, zonas de tejido vas,:ular y áreas de células meristemáticas localizadas en 17 regiones superficiales del callo. La formación de células y grupos embriogénicos no ocurre hasta 9-12 semanas (medio de expresión) tras la desdiferenciación de células parenquimáticas del callo cuando éste muestra ya signos de disociación y necrosis. A través de las diferentes etapas de desarrollo e histodiferenciación se originan embriones somáticos así como estructuras nodulares de carácter embriogénico (roble) o masas proembriogénicas (castaño) que posteriormente generan embriones de origen unicelular o pluricelularAunque lastasasde inducción son relativamente bajas en material adulto, las líneas embriogénicas proliferan rápidamente mediante embriogénesis secundaria, y el principal problema reside en que la inducción embriogénica es altamente dependiente del genotipo. Para mejorar la etapa de inducción de ESy pueda hacerse extensiva al mayor número de genotipos, se sugiere: 1) Utilización de material derivado de tejidos que retengan carácter juvenil (renuevos basales); 2) manipulación del tamaño del explanto con el fin de interrumpir los fenómenos de correlación entre tejidos ('thin cell layer'); 3) aplicación de medios condicionantes o nodriza por su posible contenido de moléculas solubles extracelulares secretadas por tejidos embriogénicos, del tipo arabinogalactanoproteínas (AGPs),quitinasas (endoquitinasas) y que puedan actuar como moléculas señal; 4) estudios moleculares dirigidos hacia la identificación y caracterización de genes relacionados con el proceso de embriogénesis en estas especies.En el mantenimiento y proliferación de las líneas embriogénicas originadas en los cultivos iniciales se pone de manifiesto el enorme potencial que representa el establecimiento de cultivos embriogénicos en suspensión, utilizados ya en roble y castaño, como un sistema para incrementar la producción de embriones y mejorar su calidad (individualización y sincronización); las suspensiones embriogénicas posibilitan además el uso de biorreactores y la aplicación de sistemas de inmersión temporal que podrían mejorar su posterior germinación y conversión en plántula, etapa también problemática en estos sistemas embriogénicosPeer reviewe

Somatic embryogenesis in Camellia spp

Peer reviewe

Plantlet formation from embryonic tissue of chestnut grown in vitro

Development of axillary shoots was induced when isolated embryonic axes of chestnut (Castanea sativa Mill.) were cultured on a defined medium containing 6‐benzyl‐aminopurine (BAP). The optimal concentrations of BAP were determined for development of axillary shoots from both embryonic axes and subcultured shoots. After shoot multiplication a great number of shoots have been maintained sequentially without significant change in the proliferative rate for one year. Limited rooting has been obtained with excised shoots. Indole‐3‐butyric acid (IBA) at 2 mg/l was used to induce root primordia. After 8 days of treatment the plantlets were transferred to an auxin‐free medium for root development

Chestnut (Castanea spp)

Peer reviewe

Somatic Embryogenesis in Chestnut

Somatic embryogenesis is an important biotechnological tool that demonstrates significant benefits when applied to forest tree species; clonal propagation, cryostorage of valuable germoplasm and genetic transformation are among the most promising of its applications. In this chapter, the state of the art of somatic embryogenesis in chestnut (an important economical tree species of the genus Castanea) is assessed and discussed. The factors affecting the induction (type of explant, growth conditions, mineral media, plant growth regulators), maintenance and multiplication of the embryogenic cultures (through repetitive embryogenesis) and the maturation and conversion into plants of somatic embryos are described. The latest results achieved on the application of the process on both genetic transformation and cryoconservation of chestnut embryogenic lines are also mentioned.Peer reviewe

Thidiazuron-induced high-frequency plant regeneration from leaf explants of Paulownia tomentosa mature trees

Attempts were made to study the effect of thidiazuron (TDZ) on adventitious shoot induction and plant development in Paulownia tomentosa explants derived from mature trees. Media with different concentrations of TDZ in combination with an auxin were used to induce adventitious shoot-buds in two explant types: basal leaf halves with the petiole attached (leaf explant) and intact petioles. Optimal shoot regeneration was obtained in leaf explants cultured on induction medium containing TDZ (22.7 or 27.3 μM) in combination with 2.9 μM indole-3-acetic acid (IAA) for two weeks, and subsequent culture in TDZ-free shoot development medium including 0.44 μM BA for a further 4-week period. The addition of IAA to the TDZ induction medium enhanced the shoot-forming capacity of explants. The caulogenic response varied significantly with the position of the explant along the shoot axis. The highest regeneration potential (85-87%) and shoot number (up to 17.6 shoots per explant) were obtained in leaf explants harvested from the most apical node exhibiting unfolded leaves (node 1). An analogous trend was also observed in intact petiole explants, although shoot regeneration ability was considerably lower, with values ranging from 15% for petioles isolated from node 1 to 5% for those of nodes 2 and 3. Shoot formation capacity was influenced by the genotype, with regeneration frequencies ranging from 50 to 70%. It was possible to root elongated shoots (20 mm) in basal medium without growth regulators; however, rooting frequency was significantly increased up to 90% by a 7-day treatment with 0.5 μM indole-3-butyric acid, regardless of the previous culture period in shoot development medium (4 or 8 weeks). Shoot quality of rooted plantlets was improved not only by IBA treatment but also by using material derived from the 4-week culture period. Regenerated plantlets were successfully acclimatized in the greenhouse 8 weeks after transplanting.Parcialmente Ministerio de Educación y Ciencia, Proyecto: AGL2005-00709.Peer reviewe